Modifikasyon fosforilasyon
Rechèch sou pwoteyin fosforil ak peptides ka ede moun elicide mekanis pwosesis ki anwo a ak plis konprann nati aktivite lavi yo. Nan dènye ane yo, ak devlopman kontinyèl nan teknoloji proteomik, etid la nan fosforilasyon pwoteyin te resevwa pi plis ak plis toupatou atansyon. Anpil toksin natirèl ak patojèn tou fè egzèsis efè yo lè yo chanje estati fosforilasyon pwoteyin entraselilè yo.
Polypeptides phosphorylated sitou refere a Ser, Tyr ak Thr Gwoup idroksid bò chèn nan rezidi a modifye nan yon polipeptid fosfat asid. Jiskaprezan, modifikasyon fosforilasyon polipèptid yo sitou enplike metòd post-fosforilasyon ak de metòd sentèz:
Lè yo modifye pa metòd monomè a, asid amine fosforil la difisil pou kondanse ak chèn peptide akòz antrav esterik ki te koze pa pi gwo gwoup modifikasyon chèn bò, ak entwodiksyon ki vin apre asid amine ap pi difisil. Espesyalman lè li gen plizyè modifikasyon sit fosforilasyon, sentèz la ap vin trè difisil, ak pwodwi final la gen eleman konplèks, li difisil pou separe, epi li gen yon sede trè ba. Se poutèt sa, lè plizyè sit nan chèn peptide yo fosforilasyon, yo ka konsidere metòd post-fosforilasyon an. Pwosesis sentèz prensipal la se oaza retire gwoup ki pwoteje chèn bò nan asid amine yo dwe make apre sentèz polypeptid la fini. Pou Tyr, Thr asid amine ak chenn bò san pwoteksyon yo ka itilize dirèkteman pou reyaksyon an. Side chèn pwoteje gwoup nan 1% TFA / DCM Li ka quantitatively retire nan sèten kondisyon. Pandan post-fosforilasyon, yo ka itilize bis benzyl fosforamidit. Tetrazole a jenere fosforamidit tetrazole entèmedyè aktif, ki konekte ak gwoup idroksil la, ak Lè sa a, soksid anba kondisyon peroksiasid pou jenere yon gwoup fosforil pou konplete reyaksyon an.
- Nou bay sèvis modifikasyon fosforilasyon pSer, pTyr, pThr ak D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
- Modifikasyon fosforilasyon nan 2 sit, 3 sit, 4 sit, ak 5 sit ka fèt ansanm.
Peptide fosforil ka sentetik (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) tann)
1. Gen 4 sit fosforilasyon nan sekans lan (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), pite a se 95% ak sik la fini se 3 semèn.
