De metòd pou koupe peptides ki soti nan rezin solid-faz
Yon metòd pou koupe polipèptid ki soti nan rezin solid-faz
solid faz Fmoc Apre chimikman sentèz peptides, gen anpil metòd pou klivaj. Koulye a, nou pral prezante de kalite debaz yo souvan itilize pa tout moun.
1. Metòd asid fò (souvan itilize TFA)
Mete résine sèk la nan yon flakon shaker epi ajoute kantite ki apwopriye nan scavenger (scavengers) Cleaving reyaktif trifluoroacetic asid (TFA), 10-25ml / g résine, kouvri, epi souke tanzantan nan tanperati chanm. Filtre résine a ak nouvo TFA Lave résine a 2-3 fwa, konbine filtraj la, epi goute ajoute 8-10 fwa volim etè glacial. Pafwa yon pati nan li ka vapè sou TFA Yo te jwenn yon presipite peptide brit. Etè dyetilik ka refwadi ak glas pou amelyore efikasite presipitasyon. Finalman, kolekte peptide brit presipite a.
Rezin aplikab:wa résine oswa Rink Amide résine
2. Metòd asid fèb (dilye TFA oswa asid acetic)
1% TFA:
1 g Yo te ajoute résine polypeptide-pann nan nan yon solisyon ki gen 1% TFA. Yo te sele ak souke flakon an vè solisyon dichloromethane pou 2 minit. Sèvi ak nitwojèn pou vide filtraj la nan yon lòt nouvo flacon souke metanol ki gen 10% piridin. Repete operasyon ki anwo a 10 fwa. Sèvi ak 30 ml DCM, 30 ml MeOH Lave peptides ki rete yo pwoteje sou résine a twa fwa sekans. pa TLC oswa HPLC Tcheke rezidi netwayaj la. Konbine tout filtraj la epi evapore sòlvan an anba presyon redwi pou kite volim 5%. ajoute 40 ml dlo, epi glas -refwadi melanj lan pou ede presipitasyon. Apre filtraj, lave pwodwi a ak dlo pwòp twa fwa epi mete l nan yon bwat siye vakyòm pou itilize. KOH oswa P2O5 Kite sèk.
dilye asid acetic:
sèvi ak AcOH/TFE/DCM (2:2:6) Trete peptides yo pandye sou résine a ak solisyon koupe pou 2 èdtan, filtre résine a, epi lave résine a twa fwa ak solisyon koupe. Ajoute 15 fwa volim n-hexane nan filtraj melanje a, epi evapore rotary pou retire depase asid acetic. Metòd rekiperasyon peptides yo detaye anba a.
Rezin aplikab:2- CTC Rezin